導讀：主動特異性免疫療法治療腫瘤
以樹突狀細胞為基礎，應用主動特異性免疫療法治療腫瘤，是近幾年醫學界研究人體樹突狀細胞領域最受關注的熱點。隨著越來越多的人類腫瘤特異性抗原被醫生確認和發現，為應用腫瘤抗原致敏的樹突狀細胞回輸機體而激發人體特異性抗腫瘤免疫應答奠定了基礎。目前，應用腫瘤抗原體外致敏樹突狀細胞的方式有多種。例如，腫瘤細胞凍融物、基因工程腫瘤蛋白抗原或人工合成的腫瘤抗原多肽在體外衝擊致敏樹突狀細胞；或將腫瘤抗原基因通過腺病毒、逆轉錄病毒載體等轉入樹突狀細胞。人癌胚抗原重組痘苗病毒是以天壇株痘苗病毒761株為載體所構建的、表達人癌胚抗原的重組減毒疫苗。它已被證實，能在真核系統高效而準確地表達細胞膜糖蛋白人癌胚抗原。現在，我們在以下兩個相關方面的認識已所進展：一是，腫瘤抗原基因，即人癌胚抗原DNA，通過減毒的痘苗病毒載體轉入人體樹突狀細胞後，機體內的相關反應；二是，對人癌胚抗原重組痘苗病毒轉染的樹突狀細胞在機體內所發揮的治療作用，即其所激發的抗人癌胚抗原分泌性腫瘤免疫狀態。在人體內，成熟的樹突狀細胞表現出4個主要特徵：一是，細胞形狀不規則，表面有許多樹枝狀突起；二是，細胞表面具有豐富的、有助於抗原提呈的分子，如高表達MHCⅠ、Ⅱ分子，共刺激分子B7-1、B7-2，細胞間粘附分子CD40、ICAM-1等；三是，在混合淋巴細胞反應中具有激活靜止T細胞的能力；四是，具有向局部淋巴細胞，即T細胞區遷移的能力。我們的實驗結果表明：人體外周血單核細胞在體外，經人重組粒-巨噬細胞集落刺激因子及人重組白細胞介素-4聯合刺激後具有典型的樹突狀突起，細胞表面的MHCⅡ類分子、共刺激分子B7-2和細胞間粘附分子ICAM-1、CD40的表達明顯上調。它們能在自體混合淋巴細胞反應中激發T細胞的增殖，其中，轉染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細胞對T細胞的激發作用最強。轉染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細胞，所激發的T細胞對自體腫瘤細胞的抑製作用比天壇株痘苗病毒761組T細胞及無病毒組T細胞明顯增強；但是，這3個組的T細胞，對於不屬於人癌胚抗原分泌性的腫瘤細胞SMMC-7721的抑製作用均較低，而且3組間無明顯差別。這提示，轉染了人癌胚抗原重組痘苗病毒的樹突狀細胞細胞表面能更好地提呈MHC分子-人癌胚抗原的抗原肽複合物，供T細胞識別，進而激活人癌胚抗原特異性T細胞。我們在實驗中發現：與腺病毒和逆轉錄病毒相比，痘苗病毒具有高效的真核表達載體，而且其表達的外源性蛋白質可被有效糖基化而保持原有的特性點。基於以上實驗結果我們與中山醫科大學共同研製了人癌胚抗原重組痘苗病毒。它是以中國天壇株痘苗病毒761株為載體所構建的、表達人癌胚抗原的重組減毒疫苗。現已被證實，它能在真核系統高效而準確地表達細胞膜糖蛋白人癌胚抗原。在實驗中，我們將腫瘤抗原基因人癌胚抗原DNA通過減毒的痘苗病毒載體轉入樹突狀細胞內，其目的是使樹突狀細胞產生內源性、持續性表達人癌胚抗原多個腫瘤抗原表位，並通過MHCⅠ類分子得到充分提呈。我們的實驗證明了：轉染了人癌胚抗原-重組痘苗病毒的樹突狀細胞所激發的T細胞對人癌胚抗原分泌性腫瘤細胞具有特異性殺傷作用。儘管我們的實驗已取得了頗具意義的結果，但是尚有以下問題須要進一步探討與完善：一是，轉染時所需病毒的劑量；二是，進行轉染時所需要的時間；三是，經病毒轉染後，樹突狀細胞的表面標誌物的改變；四是，樹突狀細胞與T細胞共同孵育的最佳比例及時間；五是，被激活的T細胞其表面所分化抗原的改變。 (編輯:)
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